പോളിയാക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് മുൻകരുതലുകൾ

· പോളിക്രിലാമൈഡ്അക്രിലാമൈഡ് മോണോമർ, പോളിമറൈസേഷൻ ആരംഭിക്കുന്ന മെറ്റീരിയൽ, ഷാലിമേഷൻ, ഉപ്പ്, ബഫർ മിശ്രിതം എന്നിവയിലൂടെ ജെൽ ഉണ്ടായിരിക്കണം.

· അക്രിലാംഡെഡ്ഒപ്പം ബിഐഎസ് (എൻ, എൻ '- മെത്തിലീൻ ഇരട്ട അക്രിലാമൈഡ്) മോണോമർ ജെൽ മാട്രിക്സ് ആണ്.

· അമോമോണിയം വിശദീകരിക്കാൻ പശ പശ പശ ആരംഭ പ്രക്രിയ ആരംഭിക്കുക. പശയുടെ രൂപീകരണം വെള്ളത്തിൽ തയ്യാറാക്കിയ 10% അമോണിയം നിരന്തരമായ പരിഹാരം ആവശ്യമാണ്. മിക്ക വിവരങ്ങളും സജീവ ഉപയോഗത്തിന്റെ ആവശ്യകത സൂചിപ്പിച്ചു. എന്നിരുന്നാലും, 10% പരിഹാരം നിരവധി ആഴ്ചകളായി 4 ℃ ൽ സ്ഥാപിക്കാം. 10 മില്ലി വരെ ഉണ്ടാക്കുക, പശ സമാഹരിക്കുന്നതിൽ പരാജയപ്പെടുമ്പോൾ ഉപേക്ഷിക്കുക.

നുറുങ്ങ്: ന്റെ ശതമാനംഅക്രിലാംഡെഡ്തുടർച്ചയായ പശ, പ്രോട്ടീൻ പശ എന്നിവയും സമാനമല്ല. പ്രേമദേവ് അക്രിലാമൈഡ് ഉപയോഗിക്കുകയാണെങ്കിൽ: ബിസ് സൊല്യൂഷൻ, വലത് കുപ്പി ലഭിക്കുന്നത് ഉറപ്പാക്കുക.

· തീംഫെഡ് (N, N, N ', N' - ടെട്രാമെഥൈൽ എത്തിലേഡിയാനിഡിയാനിഡിഎനിഡിയാനിഡിഎൻ) തവിട്ടുനിറത്തിലുള്ള കുപ്പിയിൽ ഒരു ഉത്തേജകമാണ്, റഫ്രിജറേറ്ററിൽ സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്നു. പശ ഒഴിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് ചേർക്കുക.

· പോളിയാക്രിമാർഡ് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിലെ ഉപയോഗിച്ച ഗ്ലാസ് ഓരോ സമയത്തിനും മുമ്പും ശേഷവും കഴുകിക്കളയണം. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് ശേഷം, ചൂടുള്ള സോപ്പ് വെള്ളത്തിൽ മൃദുവായ ബ്രഷും തുണിയും ഉപയോഗിച്ച് കഴുകുക, വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ കഴുകുക, ഉണങ്ങാൻ നിൽക്കുക.

· ഈർപ്പവും പൊടിയും പൊള്ളയായ പോളിമറിന് കാരണമാകും. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് മുമ്പായി, ഗ്ലാസ് ക്ലീനർ ഉപയോഗിച്ച് ഗ്ലാസ് പ്ലേറ്റ് വൃത്തിയാക്കി മൃദുവായ ബ്രഷ് ഉപയോഗിച്ച് തുടയ്ക്കുക. വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ കഴുകി ഒരു പേപ്പർ വൈപ്പിനൊപ്പം നന്നായി വരണ്ടതാക്കുക. കടലാസ് ഉപയോഗിച്ച് തുടയ്ക്കുന്നതിന് മുമ്പ് 70% എത്തനോൾ ഉപയോഗിച്ച് കഴുകുന്നത് ഉണങ്ങാൻ സഹായിക്കുന്നു. അക്രിലാമൈഡിന്റെ സാമ്പിളുകൾ ചേർക്കുക: ബിഐഎസ്, വാട്ടർ, ബഫർ ലായൻ, അമോണിയം പ്രതിന്യം, ടെം. നന്നായി കുലുക്കി ഉടനടി ഒഴിക്കുക.

പോളിമറൈസേഷനു മുമ്പുള്ള പോളിയാക്രിലാമൈഡ് ഡിഗാസ് ചെയ്യേണ്ട ആവശ്യമില്ല. (അക്രിലാമൈഡ് കുമിളകൾ നീക്കം ചെയ്യുന്നതിനായി ഒരു വാക്വം സ്ഥാപിക്കും, കാരണം ഓക്സിജൻ പോളിമറൈസേഷനെ തടയുന്നു.)

തിരശ്ചീന പശ പോയിന്റ് സാമ്പിൾ ടിപ്പുകൾ.

About കൂടുതൽ വ്യക്തമായി കാണാൻ ചില സാമ്പിൾ ദ്വാരം ഉണ്ടാക്കാൻ കറുത്ത പശ്ചാത്തലം, കറുത്ത പശ്ചാത്തലം, കറുത്ത പശ്ചാത്തലം ഇടുക.
കോലോയിഡിന് മുകളിൽ, പശ ടാങ്ക് നിറച്ച ബഫർ.
· അരികിന് ഒരു പ്രകാശം ഉണ്ടെങ്കിൽ, ലൈറ്റുകൾ ഓണാക്കുക, വെളിച്ചം മൂടൽമഴക്കട്ടെ. പൈപ്പറ്റിലേക്ക് സാമ്പിൾ വരയ്ക്കുക.
Actorication യാന്ത്രിക പൈപ്പ്റ്റിംഗ് ഉപകരണം ഉപയോഗിക്കുന്നു.
· 10-200 MU 1 ൽ മുമ്പിലെ മിക്ക പോയിന്റുകളിലും ഉപയോഗിക്കാൻ കഴിയും. വളരെ ചെറിയ സാമ്പിൾ ദ്വാരങ്ങൾ (10μ1 ൽ താഴെ), തുടർച്ചയായ പശയ്ക്ക് ഉപയോഗിക്കുന്ന നീളമുള്ള പൈപ്പറ്റ് തല കൂടുതൽ സൗകര്യപ്രദമാണ്.

· പൈപ്പ്റ്റിംഗ് സാമ്പിളിൽ മുഴുകി, പതുക്കെ നീളുന്നു. സാമ്പിൾ ഗ്ലിസറിൻ ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റിക്കി ദൃശ്യമാകും, ദ്രുതഗതിയിലുള്ള പമ്പിംഗ് വായു കുമിളകളെ പൈപ്പറ്റ് തലയിലേക്ക് വരച്ചേക്കാം.

പൈപ്പ്റ്റിംഗ് ഹെഡ് ശ്വസിച്ചതിനുശേഷം സാമ്പിളുകൾ, പൈപ്പിന്റെ അരികിൽ ഫ്ലൂയിഡ് ഹെഡ് സ ently മ്യമായി നീങ്ങും അല്ലെങ്കിൽ ഡ്രോപ്പ്ഇകൾക്ക് പുറത്ത് പേപ്പർ നുകരണത്തിന്റെ അരികിൽ സ ently മ്യമായി നീക്കും. സാമ്പിൾ വലിക്കാതിരിക്കാൻ ശ്രദ്ധിക്കുക.

സാമ്പിൾ സാമ്പിൾ ഹോളിൽ വയ്ക്കുക

അല്പം സമ്മർദ്ദം നിലനിർത്താൻ ഉപകരണം പൈപ്പ്റ്റിംഗ് ഉപകരണം, സാമ്പിളുകൾ ഓവർഫ്ലോ ദ്രാവക തലയിലേക്ക് നീക്കുക.
Paipeting hay supfer- ൽ ചേർത്ത്, സ്പോട്ട് ദ്വാരത്തേക്കാൾ അല്പം കൂടുതലാണ്, പോസിറ്റീവ് മർദ്ദം നിലനിർത്തുക. പൈപ്പറ്റിന്റെ അഗ്രം ഒരു ചെറിയ ദ്വാരത്തിലേക്ക് ചേർക്കാം.
· പതുക്കെ, ക്രമാനുഗതമായി സാമ്പിൾ. PIPTET ടിപ്പ് പോയിന്റ് സാമ്പിൾ ഹോൾക്ക് മുകളിൽ സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്നു, സാമ്പിൾ ദ്വാരത്തിലേക്ക് മുങ്ങും. സാമ്പിൾ ദ്വാരം തള്ളുന്നതിനുപകരം പൂരിപ്പിക്കുന്നതിന് സാമ്പിൾ സിങ്കിനെ അനുവദിക്കുക.
The ദ്യോഗികമായി ദ്രാവകം രണ്ടാം കാലുകളിലേക്ക് നീങ്ങും, പതുക്കെ ദ്രാവക നീക്കം ഉയർത്തുക, ബഫറിൽ നിന്ന് പുറത്തേക്ക് പോകുക

ലംബ പശ സാമ്പിൾ എങ്ങനെ ചെയ്യാം?

· ലംബ പശ പോയിന്റ് സാമ്പിൾ രണ്ട് ഗ്ലാസ് തമ്മിൽ രൂപം കൊള്ളുന്നു. വളരെ നേർത്ത പശയിൽ, പൈപ്പറ്റ് തലയിൽ രണ്ട് ഗ്ലാസ് പ്ലേറ്റുകൾക്കിടയിൽ ഉൾപ്പെടുത്താൻ കഴിയില്ല. ഗ്ലിസറിൻ കാണുക! സാമ്പിൾ ഹോമിൽ പൈപ്പറ്റ് തല ഇടുക, സാമ്പിൾ ദ്വാരത്തിലേക്ക് മുങ്ങും.
· ലോം സാമ്പിൾ മുമ്പ്, പോളിപ്രോപൈലിൻ അസൈൽ ജെൽ സാമ്പിൾ ദ്വാരത്തിന്റെ ലംബ പോയിന്റ് വൃത്തിയായി ഇടുന്നത് ഉറപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു. അക്രിയോളിയവൽക്കരിച്ച അക്രിലാമൈഡ് കഴുകുക, സാമ്പിൾ ദ്വാരത്തിന്റെ അടിയിൽ ദൃശ്യമാകുന്ന വെള്ളവും. വെള്ളം സാമ്പിൾ ദ്വാൽ ഗണ്യമായി മാറ്റാം. 25 മില്ലി അല്ലെങ്കിൽ 50 മില്ലി സിറിഞ്ചും 18 ഗേജ് സൂചിയും ഉപയോഗിക്കുക. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫറിൽ ഒഴിച്ച് സാമ്പിൾ ദ്വാരം ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം ഫ്ലഷ് ചെയ്യുക.
The സാമ്പിൾ ദ്വാരം കാണാൻ പ്രയാസമാണ്, പക്ഷേ അതേപോലെ, ബാക്കിയുള്ളത് എളുപ്പമാണ്. അധിക ദ്വാരങ്ങൾ ഉണ്ടെങ്കിൽ, സാമ്പിൾ ബഫർ ബ്രോമോഫെനോൾ നീല ഉപയോഗിച്ച് പരീക്ഷിക്കാൻ കഴിയും.